當(dāng)我們獲得了Micro Drop超微量分光光度計(jì)檢測(cè)結(jié)果后，對(duì)光譜的正確分析至關(guān)重要。

1. A260nm——核酸更高吸收峰的吸收波長(zhǎng)。

2. A280nm——蛋白更高吸收峰的吸收波長(zhǎng)。

3. A230nm——是碳水化合物更高吸收峰的吸收波長(zhǎng)。

4. A340nm——是基線校準(zhǔn)波長(zhǎng)，為檢測(cè)溶液樣品的濁度和其他干擾因子。該值應(yīng)該接近0.0。如果不是，表明溶液中有懸浮物，需要純化樣品。純樣品的A340一般是0。

●   苯酚/ Trizol萃取——?dú)埩粼噭┪廴究梢酝ㄟ^(guò)220至240nm之間的異常光譜以及260至280nm區(qū)域的偏移來(lái)表示。加氯仿離心后取上清的時(shí)候千萬(wàn)不要貪多，那樣就很容易被蛋白污染。

●   純化柱提取——?dú)埩綦铱赡苡兄?30nm附近的峰值和從230nm到240nm的波谷偏移。

●   磁珠法提取——?dú)堄嘀榭赡軙?huì)導(dǎo)致光散射，并導(dǎo)致異常光譜。

1. A260/A280、A260/A230比值受溶液酸堿度及離子強(qiáng)度的影響，如酸溶液會(huì)使A260/A280比值降低，低離子強(qiáng)度和低 pH 溶液會(huì)增加 280 nm 處的光吸收值。因此必須確?？瞻讬z測(cè)和溶解樣品所用Buffer的離子濃度和pH值一致。

2. 濃度接近2 ng/μl濃度的樣品可能會(huì)導(dǎo)致不可靠的260/280和/或260/230的比值。

3. 樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素，由于樣品中不可避免存在一些細(xì)小的顆粒，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在會(huì)干擾測(cè)試效果。樣品的濃度不能過(guò)低，或者過(guò)高（超過(guò)光度計(jì)的測(cè)試范圍）。

4. 樣品混合要充分，否則吸光值太低，甚至出現(xiàn)負(fù)值；混合液不能存在氣泡，空白液無(wú)懸浮物，否則讀數(shù)漂移劇烈。樣品混合不均勻會(huì)直接導(dǎo)致檢測(cè)不確定，重復(fù)性低。

5. 樣品檢測(cè)上樣量不能太少，必須能夠保證能后連接上下兩根光纖形成光柱，從而使得檢測(cè)正常進(jìn)行。

6. 樣品臺(tái)清潔，在檢測(cè)前，檢測(cè)后以及連續(xù)使用儀器30分鐘后均需要對(duì)上下接觸樣品的部位用雙蒸水或純水擦拭。

7. 切忌不可用噴壺在樣品臺(tái)上噴射，以防液體液體進(jìn)入儀器內(nèi)部造成損壞。

8. 切忌不可用洗滌劑或異丙醇清潔基座。

9. 儀器放置位置應(yīng)當(dāng)遠(yuǎn)離通風(fēng)口，以免液滴蒸發(fā)太快導(dǎo)致濃度讀數(shù)偏大。